作者:崔晓萍 陈建梅 穆军山 叶建新 殷红兵 林...低氧神经干细胞星形胶质细胞条件培养液增殖
摘要:目的探讨体外低氧条件下星形胶质细胞对海马神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法将分离出的新生小鼠海马NSCs分别与低氧条件星形胶质细胞培养液(低氧组)、低氧条件星形胶质细胞培养液+磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)通路拮抗剂LY294002(拮抗剂组)以及常氧条件星形胶质细胞培养液(对照组)共培养;分别于培养24h、48h、72h应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组NSCs活性;应用Western Blot法检测各组NSCs磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK)-3B含量。结果(1)共培养24h、48h及72h,低氧组NSCs活性的光密度(OD)值分别为0.292±0.006、0.382±0.005、0.649±0.028,拮抗组分别为0.197±0.003、0.255±0.005、0.325±0.012,对照组分别为0.107±0.006、0.198±0.008、0.254±0.006;低氧组各时间点NSCs活性显著高于拮抗剂组和对照组(均P〈0.05);(2)共培养24h、48h和72h,低氧组NSCsp-Akt和p-GSK-313的吸光度(A)值分别为0.52、0.71、0.86及0.49、0.65、0.82;拮抗剂组分别为0.39、0.42、0.61及0.31、0.35、0.40;对照组分别为0.34、0.38、0.39及0.28、0.31、0.35;低氧组各时间点p-Akt及p-GSK-3B含量显著高于拮抗剂组和对照组(均P〈0.05)。结论缺氧刺激可激活星形胶质细胞P13K/Akt信号通路,促进NSCs增殖。
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