作者:黄茵; 黄涌泉; 陈剑; 谭广毅; 伍卫大鼠心室肌细胞肝细胞生长因子交感神经重构神经生长因子
摘要:目的观察生长因子疗法对体外缺氧预处理心肌细胞合成分泌神经生长因子(NGF)的影响。方法体外分离培养新生大鼠心室肌细胞(NRVMs)并鉴定后分为两组,第一组为未经缺氧预处理的原代心肌细胞,第二组更换无血清无糖培养基(L-DMEM),并将细胞培养皿置入缺氧培养箱培养24 h,缺氧处理组再根据不同的干预手段分为6个亚组:NRVMs组、肝细胞生长因子组(HGF组)、胰岛素样生长因子-1组(IGF-1组)、联合因子组(GFs组)、1/4×GFs组、2×GFs组。培养48 h后,利用RT-PCR方法检测上述7组心肌细胞NGFmRNA表达水平;ELISA方法检测上述7组心肌细胞上清液NGF蛋白水平。结果缺氧环境可诱导大鼠NRVMs NGFmRNA及NGF蛋白表达水平上调,而不同因子疗法均可抑制NRVMs产生NGF,其中以联合因子组GFs对NGF的调节作用最明显,且差异有统计学意义(P〈0.05)。而不同浓度的联合因子(1/4×GFs、GFs及2×GFs)均可抑制NRVMs分泌NGF(P〈0.01),其中GFs中等浓度及2×GFs高浓度较1/4×GFs低浓度组抑制作用更显著(P〈0.05),但中等浓度GFs及高浓度2×GFs之间并不存在统计学差异(P〉0.05)。结论缺氧环境能显著上调大鼠NRVMs NGF的表达水平,促进交感神经重构,而生长因子疗法尤其是高浓度的联合因子疗法可通过抑制NGF释放从而减轻交感神经重构,发挥预防心梗后心脏性猝死的作用。
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