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大鼠耳蜗大上皮嵴及小上皮嵴细胞永生细胞系的建立

作者:张媛; 郭维维; 宋巍; 郑贵亮; 翟所强耳蜗大上皮嵴小上皮嵴永生细胞系

摘要:目的:建立大鼠耳蜗大、小上皮嵴细胞永生细胞系。方法:取P1大鼠耳蜗,分离出耳蜗上皮薄片组织,并与含SV40-LT抗原的逆转录病毒共培养,从而实现细胞的永生化。利用单克隆法纯化细胞系,并通过形态学、免疫组织化学等方法对细胞系进行鉴定。结果:大鼠耳蜗大、小上皮嵴细胞永生细胞系基本保持了细胞原代的表型特征:呈现上皮细胞样的多角形外观;不同世代的细胞均表达Isletl及SV40-LT抗原。该系目前已培养3个月,超过20代,传代时间为3~4d,传代比例为1:5。结论:本实验成功建立了大鼠耳蜗大、小上皮嵴细胞的永生细胞系,这为大、小上皮嵴细胞生物学特性及相关功能,特别是毛细胞再生及前体细胞移植治疗感音神经性聋方面的研究奠定了坚实的实验基础。

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临床耳鼻咽喉头颈外科

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