作者:马晶晶; 李良璧; 荆玉祥; 匡廷云cytb559定点突变叶绿体转化衣藻
摘要:为研究细胞色素b559(Cyt b559)在光合系统中的功能,采用大引物定点突变技术,将衣藻叶绿体Cytb559α亚基(psbE基因编码)中与组氨酸(His^23)相邻的氨基酸残基丝氨酸(Ser^24)定点突变为苯丙氨酸(Phe),获得突变体S24F.对突变体的生理生化分析表明,S24F既能进行光合自养也能进行光合异养,但是在自养和异养条件下,其生长速率比对照慢;S24F的PSⅡ放氧活性约为野生衣藻细胞的71%.S24F的光系统Ⅱ(PsⅡ)光化学效率地比野生型对照低约0.23.此外,相比野生型对照,突变体S24F对强光更加敏感;SDS-PAGE和Western杂交的结果表明,对Cytb 559α亚基中ser24的定点突变影响了Cytb559α亚基及其他膜蛋白,如LHCⅡ和PsbO等的表达.上述结果说明,虽然Ser^24残基并不参与血红素配位,但其对维持PSⅡ的活性具有重要作用。
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