作者：宁浩辰小檗碱巴马汀药根碱表小檗碱黄连碱hplc
摘要：目的:建立准确,可信的方法,运用HPLC测定血浆中5种小檗碱型生物碱。方法:色谱条件为:C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm);流动相(水:乙腈=430:570,每升KH2PO44g,SDS 2.5g),流速1.0ml/min;检测波长345nm。储备液用甲醇稀释10、100、500、1000,2000,5000,10000,20000倍。然后将以上7份溶液分别加入9倍体积的大鼠空白血浆中,得7份样品用于线性考察实验。储备液用分别用甲醇稀释100倍,300倍,50000倍。再取储备液用甲醇稀释10倍,30倍,500倍,再分别取样加入到9倍体积的大鼠空白血浆中,所得样本用于精密度、回收率和稳定性考察实验。血浆样本处理:120μl血浆加入空白EP管中,移液枪量取120μl乙腈加入血浆,涡旋3分钟,以13000r/min离心10min,取上清进样分析,进样体积100μl。结果:各生物碱在色谱图中的专属性良好,小檗碱回归方程为y=2.9E+5x+1975.2,r2=0.9993,巴马汀回归方程为y=3.8E+5x-3160.5,r2=0.9991,黄连碱回归方程y=3.2E+5x-1791.4,r2=0.9991,表小檗碱回归方程为y=4.2E+5x-3412.1,r2=0.9992,药根碱回归方程为y=3.3E+5x-2678.6,r2=0.9992。线性均良好,精密度,稳定性的RSD值均在可接受范围内。
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