作者：徐丹丹; 赵建江; 褚洪星; 盘杰; 陈军; 邱...蛋白质芯片舌鳞癌细胞株炎症因子差异因子
摘要：目的研究应用蛋白质芯片（抗体芯片）技术筛选、分析人舌鳞状细胞癌细胞株中差异性炎症因子的效果,为进一步探讨口腔癌与炎症的关系奠定基础。方法体外培养人舌鳞癌细胞株UM-1、CAL-27、Tca-8113和人正常口腔黏膜上皮细胞,消化后分别提取胞内、胞外蛋白,上芯片孵育,封闭,清洗。采用激光扫描仪扫描芯片,Axon GenePix Pro6.0软件提取芯片数据,对获得的80种炎症因子表达数据采用AAH-CYT-G5软件分析,上调因子信号值以大于200、比值大于2.0为纳入标准;下调因子信号值以大于200、比值小于0.66为纳入标准,分别对3种人舌鳞癌细胞株（UM-1、CAL-27、Tca-8113）与人正常口腔黏膜上皮细胞,以及高侵袭性细胞株（UM-1、CAL-27）与低侵袭性细胞株（Tca-8113）进行两两比较,筛选出差异性炎症因子。挑选3种显著差异性炎症因子,用酶联免疫吸附法再次检测其蛋白表达,所得结果用单因素方差分析进行统计学分析,进一步验证芯片法所获得的结果。结果根据纳入标准,从检测的80种因子中筛选出有表达的炎症因子9个,包括干扰素诱导蛋白10（inter-feron inducible protein10,IP-10）、巨噬细胞炎症蛋白-1β（macrophage inflammatory protein1β,MIP-1β）、巨噬细胞炎症蛋白-3α（macrophage inflammatory protein-3α,MIP-3α）、骨保护素蛋白（osteoprotegerin,OPG）、调节活化蛋白（regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted,RANTES）、白细胞介素1β（interleukin1β,IL-1β）6种舌鳞癌细胞株中高表达的细胞因子,及单核细胞趋化因子4（monocyte chemoattractant protein4,MCP-4）、胰岛素样生长因子结合蛋白4（insulin-like growth factor binding protein-4,IGFBP-4）、转化生长因子-β3（transforminggrowth factor-β3,TGF-β3）3种舌鳞癌细胞株中低表达的细胞因子。鳞状细胞癌细胞和正常口腔鳞状上皮细胞之间比较,胞内IL-1β呈高表达,MCP-4呈低表达,胞
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