作者:徐艳; 章锦才; 张蕴惠; 刘怡人牙龈成纤维细胞重组质粒pcdna3基因转染瞬时表达脂质体介导进行体表达功能导入
摘要:目的检测以sIL-1R胞外成熟肽编码区基因作为目的基因构建的重组质粒pcDNA3/sIL-1R(Ⅰ)对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达量,为pcDNA3/sIL-1R(Ⅰ)导入动物牙龈组织提供依据.方法人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代,重组质粒用脂质体包裹介导进行体外转染.ELISA法对重组质粒在人牙龈成纤维细胞的表达产物进行含量检测.结果 sIL-1R(Ⅰ)在基因转染24 h内开始表达,72 h最高,转染组细胞培养液和细胞冻融液中sIL-1R表达量均显著高于对照组(P<0.05),1周后表达逐渐减弱,2周后仍有少量表达.结论通过脂质体介导的基因转染方法,重组质粒pcDNA3/sIL-1R(Ⅰ)在人牙龈成纤维细胞系中具有表达功能,并且其胞外及胞内均具有特异性表达产物.
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