作者:韩巍; 王潇宇; 高羽萱; 刘娜; 张维; 李鸿...大鼠骨髓间充质干细胞炎症成骨分化直流微电场
摘要:目的:探究直流微电场(DCEF)对炎症微环境下的大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)成骨分化作用的影响。方法:提取、培养及鉴定rBMSCs;以10mg/ml的TNF-α诱发细胞炎症反应,采用ELISA及实时定量PCR检测IL-1β及TNF-α的分泌量及基因表达;对正常rBMSCs(H-rBMSCs)组及炎症微环境下rBMSCs(H+cy tok ines)组加载DCEF,MTT法测生长曲线,茜素红染色及钙离子沉积量检测,实时定量PCR检测成骨基因BSP、OCN、Runx2的表达,Western blot检测成骨蛋白ALP及Runx2的表达量。结果:H+cytokines组细胞IL-1β及TNF-α的分泌量均明显高于H-rBMSCs组(35.6±3.0比12.2±1.5;49.2±3.5比14.9±2.1,P〈0.05);H+cy tok ines组IL-1β及TNF-α基因表达水平分别是H-rBMSCs组2.5倍、2.2倍;H+cy tok ines+DCEF组及H-rBMSCs+DCEF组BSP、OCN、Runx2基因表达水平及ALP、Runx2蛋白表达水平分别高于H+cytokines组及H-rBMSCs(P〈0.05),H+cytokines+DCEF组部分成骨能力指标高于H-rBMSCs(ALP蛋白表达水平:0.95±0.08比0.43±0.04,R unx 2蛋白表达水平:0.85±0.08比0.31±0.04;P〈0.05)。结论:DCEF可促进炎症微环境下的rBMSCs增殖及成骨分化。
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