作者:赵晓南; 宁德明; 李多; 罗春蕊; 李娟; 伏...h3n2突变
摘要:目的建立A(H3N2)亚型流感病毒R292K和N294S突变位点Taq Man-MGB探针检测方法.方法由NCBI获取的6株流感疫苗株及2012年~2015年本实验室分离的17株,共计23条A(H3N2)亚型毒株NA基因全序列.根据序列比对结果,特异性设计针对R292K和N294S突变位点的Taq Man-MGB探针及引物进行3重realtime RT-PCR检测方法.使用倍比稀释的方法检测其敏感性.并利用临床标本,其他亚型流感及其他常见呼吸道病毒验证该方法的特异性.结果设计的Taq Man-MGB探针可以检测到107(1000 copies)稀释度的对应模板,使用其他亚型流感病毒与常见呼吸道病毒验证该引物无交叉反应.通过对57份日常监测分离毒株进行检测,未发现耐药位点突变株.结论建立了A(H3N2)亚型流感病毒R292K和N294S突变位点Taq Man-MGB探针检测方法;验证了该引物探针具有较高的敏感性与特异性,具有实际应用潜力.
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