作者:张金国; 景强等位基因阶梯
摘要:目的用分子克隆技术制备D5S818、D19S253、DYS447、DYS448等4个STR基因座等位基因阶梯,解决STR分型的准确性和标准化问题,建立制备STR基因座等位基因阶梯的新方法,并且应用自制的D19S253基因座等位基因阶梯,进行该基因座在所选样本中的群体遗传学调查,探讨等位基因阶梯的法医学应用价值.方法用一种改进的酚、氯仿、异戊醇方法提取DNA,采用PCR扩增,聚丙烯酰氨凝胶电泳,银染显带分析技术,分子克隆技术和DNA测序技术,对352例男性样本,135例女性样本,PCR扩增筛选出的4个STR基因座的等位基因片段,将其插入PGEM-T载体中,导入大肠杆菌,使其随大肠杆菌的无性繁殖而复制,获得每一个等位基因片段的大量拷贝,PCR扩增鉴定,测序分析,制备出4个STR基因座的等位基因阶梯.
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