作者：顾冀海; 李亚静; 李文倩; 唐婷; 柳峰松家蝇sirtuins蛋白免疫热激重金属胁迫
摘要：【目的】探究家蝇Muscadomesticasirtl基因（Mdsirtl）在各种胁迫条件下的表达模式。【方法】以家蝇2龄幼虫cDNA为模板，PCR扩增Mdsirtl基因序列并进行生物信息学分析；实时定量PCR（qRT．PCR）检测Mdsirtl在家蝇不同发育阶段（卵、1龄幼虫、2龄幼虫、3龄幼虫、蛹和成虫）的表达变化，2龄幼虫不同组织（表皮、肠道、脂肪体和血细胞）中的表达分布，以及胁迫条件（细菌刺激、热激及CdCl，刺激）下的转录水平变化；通过RNAi干扰Mdsirtl基因表达，观察敲低Mdsirtl表达后家蝇幼虫抗病能力变化，并检测机体氧化应激水平。【结果】家蝇Mdsirtl基因编码蛋白含有SIR2结构域，与厩螫蝇StomoxyscalcitransSIR2氨基酸序列一致性为66％。qRT-PCR结果显示，Mdsirtl基因主要在家蝇蛹期表达，在家蝇2龄幼虫脂肪体中表达量较高。家蝇幼虫Mdsirtl分别在大肠杆菌Escherichiacoli刺激3h，金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus刺激6h，42℃热激30min以及30mmol／LCdCl，刺激48h时表达量达到最高峰。敲低Mdsirtl表达的家蝇幼虫受到细菌感染（大肠杆菌和金黄色葡萄球菌1：1混合感染）后存活率较对照组显著降低1．47倍，且敲低Mdsirtl后机体处于氧化应激状态，活性氧自由基水平和丙二醛含量较对照组分别升高1．58和1．59倍。【结论】Mdsirtl参与家蝇幼虫的抗菌免疫应答和抗逆反应。
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