作者：张国彦 翟保平鳞翅目东方粘虫dna提取微卫星基因分型
摘要：高质量的基因组DNA样品是分子生态学研究的先决条件。本研究目的在于探索从东方粘虫Pseudaletia separata（Walker）成虫自然种群的乙醇保存标本中分离高质量基因组DNA的有效方案。在2mL微型离心管中进行4种提取方案的实验比较，结果发现采用传统的苯酚抽提方法的2种方案提取腹部中段组织的基因组DNA，样品合格率只有7．69％～40％。但是，如果在苯酚抽提以前加入高浓度盐和十六烷基三甲基溴化铵（CTAB），就会使DNA样品合格率达到68．42％～95．28％，而且DNA平均产量达到5．59～10．04mg／g，明显高于前者的2．83～5．78mg／g（统计检验表明，在不同种群中差异显著或不显著）。研究结果还证明腹部组织比胸部组织更适宜提取DNA。对来自一个自然种群的99头东方粘虫DNA合格样品的统计分析表明，DNA提取总量（μg）与组织样品用量（mg）之间存在弱的正相关关系，平均DNA提取量（mg／g）与组织样品用量（mg）之间存在中度负相关关系。总之，在2mL微型离心管中，用10～20mg腹部组织，利用CTAB＋苯酚抽提方法可以获得高纯度和高含量的基因组DNA样品。用该方案提取的基因组DNA能够顺利地进行微卫星位点的分离和基因分型。
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