作者：孙毅; 朱淑芬; 王婧超; 韩霞; 王利; 李少...间质干细胞端粒逆转录酶实时聚合酶链反应细胞生物学
摘要：目的将绵羊端粒逆转录酶（TERT）基因表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT转入绵羊骨髓间充质干细胞（BMSCs）中,进一步研究TERT在BMSCs永生化过程中的作用。方法用RT-PCR技术扩增出带EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的TERT基因,连接到pcDNA3.1-EGFP真核表达载体。脂质体转染到BMSCs中,G418筛选出转染成功细胞,进行传代培养、生长曲线的测定以及遗传稳定性分析。结果扩增得到的TERT基因cDNA全长为1 866bp,转染BMSCs以后传至第40代时,核型分析正常率为77.78%。结论成功构建了绵羊pcDNA 3.1-EGFP-TERT真核表达载体,TERT-BMSCs传至40代时仍有较高的核型正常率。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
