作者：张凤英; 乔立君; 张金玉; 薛美兰; 葛银林乳房肿瘤凋亡抑制蛋白质类驱动蛋白rna干扰
摘要：目的探讨联合下调Survivin和纺锤体驱动蛋白（KSP）基因表达对乳癌细胞增殖和凋亡影响。方法分别化学合成针对Survivin和KSP基因mRNA的小干扰RNA（siRNAs）,分别或联合转染乳癌细胞MDA-MB-231,以空白对照组作为阴性对照。采用MTT法检测细胞增殖率,荧光定量PCR（qRT-PCR）检测Survivin、KSP、Bax和Bcl-2的mRNA表达,蛋白印迹法检测Survivin和KSP的蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果Survivin、KSP和Survivin＋KSP转染组转染48h的细胞增殖率分别为0.66±0.01、0.67±0.03、0.54±0.01,转染72h的细胞凋亡率分别为（11.61±0.89）%、（16.33±0.94）%、（45.73±1.11）%,与空白对照组相比差异有统计学意义（F=1 307.81、1 450.76,P〈0.01）,其中以双干扰组细胞增殖率最低、凋亡率最高。在各转染组中,Survivin、KSP的mRNA和蛋白表达水平均显著下降（F=48.68~490.20,P〈0.01）,Bax mRNA的表达显著增加（F=65.73,P〈0.01）,Bcl-2mRNA的表达显著减少（F=27.41,P〈0.01）。结论利用siRNAs联合下调Survivin和KSP基因表达,能有效抑制乳癌细胞的增殖、促进其凋亡,效果优于下调单个基因的表达。
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