作者:杨文玖; 邹云雯; 王志杰; 褚言琛nih3t3细胞胶原基质溶解素1
摘要:目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα-)对NIH3T3细胞成熟化所起的作用。方法体外培养NIH3T3成纤维细胞,将细胞分为空白对照组(A组)、TNF-α组(B组)及TNF-α+Anti-TNFRSF1B组(C组)。细胞制成2×108/L的细胞悬液后,接种于25 cm2培养瓶中,待细胞呈汇合状态时,换用无血清DMEM高糖培养基培养12~16 h。然后A组换用含体积分数0.02胎牛血清的DMEM高糖培养基继续培养;B组换用含100μg/LTNF-α的培养基培养;C组先加入浓度为50μg/L的Anti-TNFRSF1B作用1 h后,倒出培养基后再加入含100μg/L TNFα-的培养基继续培养。然后采用RT-PCR方法测定各组Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶3(MMP3)mRNA的表达,Western Blot方法测定各组Ⅰ型胶原蛋白和MMP3蛋白的表达。结果 B、C组MMP3 mRNA及蛋白的表达较A组升高,差异均有显著意义(t=-13.413~5.076,P〈0.05);B组较C组升高,差异也具有显著意义(t=4.441~5.076,P〈0.01);B、C组Ⅰ型胶原的表达较A组降低,差异也均有显著性(t=-4.950~5.808,P〈0.05),B组较C组降低,差异也均有显著性(t=-4.950~-3.823,P〈0.05)。结论 TNFα-可促进NIH3T3细胞活化。
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