作者：阎丽平; 王云; 王笑峰; 罗兵疱疹病毒6型101k被膜蛋白基因表达抗原决定簇
摘要：目的 构建人疱疹病毒6型（HHV-6）101K被膜蛋白的原核高效表达克隆，并进行原核表达。方法 PCR扩增HHV-6B101K被膜蛋白的主要抗原决定簇区（666～834aa）编码基因片段（nt2347～2853），并导入T载体进行测序，与GenBank中HHV6标准毒株序列比较以进一步鉴定。目的基因及表达载体pThioHisA分别经双酶切后连接，转化宿主菌E．coli BL21，应用PCR法及限制性核酸内切酶双重鉴定原核表达质粒，并经测序证实。IPTG诱导蛋白表达，SD＆PAGE电泳鉴定重组蛋白。结果 PCR获得的目的基因序列与GenBank中HHV-6B标准毒株Z29序列一致，重组质粒诱导菌表达产物出现相对分子质量为31900的融合蛋白条带。结论 HHV-6101K蛋白的原核表达克隆构建和表达成功，为进一步完善HHV-6活动性感染的血清学诊断提供了实验基础。
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