作者：谷燕娇; 高志安; 苏荣健grp78基因转染克隆筛选
摘要：目的用Grp78基因转染人肝细胞癌SMMC-7721，筛选阳性克隆并鉴定。方法利用真核表达载体pcDNA3．1＋Crp78转粢SMMC-7721，peDNA3．1＋Grp78与转染试剂的比例（μg/μL）分别为2：3、2：4、2：5、2：6、2：7、2：8、2：9，400μg/μL G418筛选阳性克隆后，传代扩增，Western Blot鉴定克隆的GrP78表达情况。应用peDNA3．1空载体作为阴性对照。结果Western Blot显示，转染后的SMMC-7721经G418筛选，除一个克隆不高表达外，其余克隆均高表达Grp78。结论Grp78转染SMMC-7721的最佳转染效率是8：2（转染试剂／DNA），由于假阳性克隆的存在，筛选后的克隆需要鉴定。
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