作者：于杨; 洪性出乙型肝炎病毒聚合酶酿酒酵母
摘要：目的尝试在酵母中表达人乙型肝炎聚合酶蛋白（HBV—P01），并用镍基颗粒队蛋白粗提物进行部分纯化。方法将全长HBV—Pol基因用PCR方法扩增并连接到在酿酒酵母高效表达的质粒中。转化株于30℃培养3d后进行诱导表达16h，4℃下收集蛋白粗提物并用镍基颗粒进行提纯。用免疫印迹技术检测表达结果。结果重组的HBV—Pol存在于该型酵母的蛋白粗提物中，该蛋白产物可被Nickel—particle提取。结论本研究为实现HBV—Pol在S．c．中的高水平表达提供了可靠依据，也便于HBV—Pol的生化特性研究以及蛋白纯化和抗体制备的进一步开展。
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