作者:王顺; 赵伟; 任宏伟rab3a
摘要:目的验证AD病人脑中存在GIF和Rab3a蛋白.方法采用GST表达系统在E.coli中把构建好的质粒pGEX-4T-GIF、pGEX-4T-Rab3a,经转化、诱导表达、亲和层析、凝血酶切和进一步纯化,得到GIF和Rab3a目的蛋白.利用已纯化好的目的蛋白做标准品,用直接型酶联免疫吸附测试(ELISA)方法初步测定AD病人脑提取物中GIF和Rab3a的蛋白含量.结果通过电泳表明,成功表达纯化得到了G蛋白Rab3a和GIF蛋白,利用Rab3a和GIF多克隆抗体用ELISA方法对AD症病人脑提取物中两蛋白的含量进行初步测定,结果表明在AD症病人的脑提取物中GIF的含量应为98.89ng/ml左右、Rab3a的含量为26.67ng/ml左右.结论在AD病人脑中存在GIF和Rab3a这两种物质.
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