芒果炭疽病菌小柱孢酮脱水酶基因SCD1的克隆与敲除载体构建

作者：刘娅楠; 蒲金基; 张贺; 周芳雪; 杨永利; ...芒果胶孢炭疽菌小柱孢酮脱水酶基因scd1克隆敲除载体

摘要：芒果炭疽病（Colletotrichum gloeosporioides）是为害芒果的重要病害之一，为了明确小柱孢酮脱水酶基因SCD1与芒果炭疽病菌致病力之间的相互关系，本研究以芒果炭疽病菌DNA为模板，利用同源克隆技术扩增SCD1，分析其序列特征、推测了其蛋白的保守结构域，并借助In—Fusion HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明，该基因DNA和cDNA全长分别为796bp、564bp，编码区有两个内含子（大小为52bp，180bp），推测编码187个氨基酸，其分子量约为21．52kD，等电点PI为5．90，与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对，发现该序列与香蕉炭疽菌（C．musae）、无花果炭疽菌（C．caricae）（登录号：GQ266389．1，GQ266386．11的小柱孢酮脱水酶基因相似性分别为98％和97％。该基因的敲除载4]gpSCDGH-1已构建成功，为下一步获得5CD1基因敲除突变体，研究该基因功能打下了材料基础。

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