作者：于书平; 袁丹丹; 崔明; 景蓉蓉; 王惠民参考物质测量不确定度数字聚合酶链反应紫外分光光度法
摘要：目的构建慢性粒细胞白血病(CML)融合基因断裂点簇集区-埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因1(BCR-ABL1)候选参考物质。方法采用分子克隆技术构建含有BCR-ABL1基因的重组质粒,测序验证后采用紫外分光光度法初步测定浓度,并采用数字聚合酶链反应(dPCR)进行浓度定值,实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)进行均匀性和稳定性研究,最终应用《测量不确定度表示指南》评定测量不确定度。结果质粒候选参考物质拷贝数浓度为(2.50±0.35)×10^6拷贝/μL,有较好的均匀性和稳定性。结论建立了制备BCR-ABL1候选参考物质的方法,构建了均匀稳定的BCR-ABL1候选参考物质。
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