作者:朱俊; 朱宇清; 朱岭峰; 蒋玲丽; 徐翀乙型肝炎病毒基因型多重聚合酶链反应杂交流式荧光点阵技术
摘要:目的 建立一种基于流式荧光点阵技术(又称液态芯片法)的针对乙型肝炎病毒(HBV)基因型B型和C型的检测方法.方法 设计HBV B和C基因型的型特异性引物,其中正向引物的5' 端作生物素化标记.在多重聚合酶链反应(PCR)扩增后将扩增产物与连接在不同荧光编码微球上的型特异性探针在同一体系中进行杂交,再用链霉亲和素一藻红蛋白进行标记,用Luminex多功能流式点阵仪进行检测.对经测序法基因分型的67例(B型24例、C型43例)样本进行检测,比较并确定方法的有效性.结果 本研究所建方法与测序法结果一致的比例为94%(63/67).在24例测序结果为B型的患者中有1例患者用自建液态芯片法检测显示B型和C型探针双阳性信号;43例测序法结果为C型的患者中有3例患者用自建液态芯片法检测为B型和C型探针双阳性信号.结论 自建液态芯片法能准确地进行HBV基因分型,尤其是当患者为HBV混合型感染时,自建液态芯片法能进一步确定不同基因型,在临床应用时更具有优势.
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