作者：岳晓静; 李卫; 李平法百草枯高效液相色谱串联质谱法方法学评价
摘要：目的 建立高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）检测血浆百草枯浓度的方法。方法 选用Phenomenex Kinetex 2.6μm HILIC色谱柱（100.0 mm×2.1 mm）,以1%甲酸水溶液（含250 mmol/L甲酸铵）为流动相A、乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,进样量为10μL,柱温为40℃;使用电喷雾电离（ESI）源,采用正离子条件下多离子反应监测扫描模式。百草枯和内标乙基百草枯的离子对分别为质/荷比（m/z）92.7→171.0和m/z 107.0→185.1。对建立的HPLC-MS/MS进行方法学评价（线性范围、定量下限、准确度、精密度、选择性和基质效应、稳定性）,并检测75例百草枯急性中毒患者的血浆百草枯浓度,采用受试者工作特征（ROC）曲线评估血浆百草枯浓度对临床结局的判断价值。结果 HPLC-MS/MS检测百草枯浓度在54.28-13 190.00 ng/mL范围内具有良好线性关系（Y=0.000 1X＋0.011 6,r2=0.998 3）。定量下限处的批内平均准确度为96.31%-120.04%,批间准确度为104.43%;高、中、低浓度批内和批间检测值与理论值的偏差均在±15%范围内;高、中、低浓度及定量下限处的批内和批间相对标准偏差（RSD）均〈15%。随机选择6份空白基质考察方法的选择性和基质效应,结果表明百草枯出峰位置无干扰,方法选择性好;高、低浓度处经内标归一化的基质因子的变异系数均〈15%,基质效应符合要求。样本室温放置可稳定1 d,2-8℃放置可稳定1周,-80℃冻存可稳定1个月,反复冻融处理3次对结果无影响。75例百草枯中毒患者的血浆百草枯浓度为2 820（0-22 200）ng/mL,死亡组血浆百草枯浓度明显高于存活组（P〈0.05）。ROC曲线分析显示血浆百草枯浓度判断临床结局的ROC曲线下面积为0.855,最佳临界值为2 431 ng/mL。结论 建立的HPLC-MS/MS方法可用于临床血浆百草枯浓度的常规检测。
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