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活化B淋巴细胞诱导健康人外周血HBcAg短肽特异性细胞毒性T淋巴细胞

作者:陈军浩; 吴超; 刘勇; 张葵cpg寡核苷酸b淋巴细胞乙型肝炎病毒核心抗原细胞毒性t淋巴细胞

摘要:目的探讨负载乙型肝炎病毒核心抗原18-27(FIBcAg18-27)序列肽的活化B淋巴细胞诱导自体外周血单个核细胞(PBMC)产生HBcAg18-27特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的能力。方法免疫磁珠法分选B淋巴细胞,与CpG寡核苷酸(CpG-ODN)(2μg/mL)和白细胞介素-4(IL-4)(2ng/mL)共培养48h,再加入人工合成的HBcAg18-27肽(50μg/mL),继续温育12h。将负载抗原肽的活化B淋巴细胞与自体PBMC进行混合淋巴细胞培养5d,采用Pro5^TM MHCPentamers技术检测HBcAg18-27特异性CTL。结果免疫磁珠法分选B淋巴细胞纯度为89.60%。荧光显微镜观察到HBcAg18-27抗原肽进入活化B细胞,流式细胞仪定量检测抗原负载率为41.3%。以此作为HBcAg18-27特异性抗原递呈细胞(APC)能够从自体PBMC中诱导出FIBcAg18-27特异性CTL。对照组(不加APC)HBcAg18.27特异性CTL为(0.20-4-0.10)%,实验组(加APC)为(0.504-0.19)%,2组差异有统计学意义(P〈0.01)。结论负载了HBcAg18-27肽的活化B淋巴细胞能够诱导自体PBMC产生HBcAg18-27特异性CTL。

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检验医学

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