作者:涂少华; 叶元康; 沈昭在elisa检测双抗体夹心elisa原方体抗最佳实验条件临床标本其临床应用pcr检测标记单抗阴性对照阳性对照交叉反应符合率特异性阳性率抗原
摘要:目的 建立检测肺炎支原体(MP)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并探讨其临床应用的可行性.方法 采用不同株MP单抗,用双抗体夹心ELISA检测MP抗原,优化该方法检测MP抗原的最佳实验条件.对MP标准株及147份临床标本进行测定,观察双抗体夹心ELISA的敏感性和特异性及该方法与聚合酶链反应(PCR)检测的符合率.结果 包被单抗量为20μg/ml,酶标记单抗1:200稀释时,阳性对照与阴性对照吸光度之比(P/N值)最大,检测MP抗原敏感度达2μg/ml,和其他支原体没有交叉反应;147份临床标本PCR检测阳性率13.6%(20/147),双抗体夹心ELISA检测阳性率12.2%(18/147),两者符合率达95.9%.结论 建立的双抗体夹心ELISA检测MP抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点.
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