作者：郭丽琼; 王秀旭; 柳永; 舒薇; 林俊芳香菇启动子活性灰盖鬼伞共转化gfp基因
摘要：利用从香菇菌丝体中克隆的启动子片段gpd-Le（613bp）和ras-Le（715bp）分别连接于报告基因gfp（绿色荧光蛋白基因）的上游,构建了启动子功能活性检测表达质粒pLg-gfp和pLr-gfp。采用PEG介导法把表达质粒pLg-gfp和pLr-gfp分别与辅助质粒pCc1001（含有trp1基因）共转化进色氨酸营养缺陷型的灰盖鬼伞粉孢子的原生质体中。经过选择培养基筛选、假定转化子的分子鉴定以及GFP荧光检测。结果表明：香菇gpd-Le启动子在灰盖鬼伞的菌丝中具有较强驱动外源gfp基因表达的活性,在荧光显微镜和共聚焦显微镜下观察到gfp基因表达的绿色荧光。而香菇ras-Le启动子没有检测到有驱动外源gfp基因表达的活性。
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