作者:苏晨; 史祥; 付汉江; 郑晓飞质粒重组融合蛋白质类rnaythdf2蛋白甲基转移酶类基因表达调控
摘要:目的构建YTH结构域m6A结合蛋白2(YTHDF2)重组表达载体,获得具有结合m6A修饰RNA活性的YTHDF2重组蛋白。方法以mRNA为模板采用RT-PCR方法扩增YTHDF2基因编码区序列,构建pET-28a-YTHDF2重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达YTHDF2融合蛋白,利用Ni2-NTA亲和胶纯化融合蛋白,Ni2-NTA磁球分析融合蛋白活性。结果与结论成功构建了pET-28a-YTHDF2重组表达载体,纯化获得了YTHDF2融合蛋白,该融合蛋白具有结合m6A修饰RNA活性。重组YTHDF2融合蛋白的获得为研究m6A修饰RNA的生物学功能提供了重要工具分子。
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