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氧合血红蛋白诱导脑微血管内皮细胞凋亡中半胱天冬酶3和细胞色素C的变化

作者:李德生; 许百男; 邱海霞; 段炼蛛网膜下腔出血脑血管痉挛细胞凋亡半胱天冬酶3细胞色素c类

摘要:目的:探讨氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,Oxynb)诱导体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMvECs)凋亡的可能机制。方法:将原代培养的大鼠BMvECs分别与10μ mol/L和100μ mol/L的OxyHb共孵育,在孵育后6、12和24h分别以流式细胞术、荧光分光光度计法和Western印迹检测线粒体跨膜电位(mitochondrial transmembrane potentials,Aψm)、半胱天冬酶3(caspase-3)和细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)的表达水平。结果:经10μmol/L和100 μmol/L OxyHb刺激6~24h后,与对照组相比,OxyHb能显著降低血管内皮细胞△ψm,而增强cyt-c和caspase-3的表达,并呈刺激时间和刺激浓度依赖性。与10 μmol/L OxyHb分别孵育6、12和24h,caspase-3的活性分别为0.103±0.010,0.126±0.010和0.234±0.031,而在Oxynb 100 μmol/L组,其6、12和24 h caspase-3的活性分别为0.154±0.012,0.205±0.020和0.302±0.015。结论:△ψm的下降、caspase-3的激活以及Cyt-C的释放可能是OxyHb诱导BMvECs凋亡的重要机制。

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军事医学

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