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几种性传播疾病病原体检测芯片的制备

作者:石岗; 文思远; 陈苏红; 王升启性传播疾病寡核苷酸芯片寡核苷酸探针淋病奈瑟球菌沙眼衣原体解脲脲支原体

摘要:目的:为了同时多样本检测和鉴别淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体3种重要的性传播疾病病原体,制备了寡核苷酸检测芯片。方法:针对3种病原体和荧光素酶基因设计特异的引物和寡核苷酸探针,采用硫代和氨基双功能探针修饰技术制备寡核苷酸芯片,以荧光标记多重不对称PCR技术为基础,通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对性传播疾病病原体的检测。结果:对10种与待检病原体无关的茵及定量有限稀释的荧光素酶和3种病原体基因质粒模板进行芯片检测,结果表明芯片对待检病原体特异,其检测4种基因的灵敏度均为5×10^3拷贝质粒。对24份性传播疾病患者标本进行芯片检测,沙眼衣原体感染率为100%,与淋病奈瑟球菌混合感染率为83.3%(20/24),与传统PCR诊断结果完全一致。在24份标本中,淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体三重感染病例芯片诊断为3例,混合感染率为12.5%(3/24);而传统PCR诊断为4例,混合感染率为16.7%(4/24),两种方法的符合率为75%。结论:该芯片是一种可靠检测3种病原体的方法,它可快速提供有关患者混合感染的情况,因而为指导个性化治疗提供及时可靠的诊断依据。

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军事医学

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