作者:张树卓; 武文; 何滢; 翁谢川; 郑建全nmda受体膜片钳术脂质体
摘要:目的:建立表达大鼠NMDA(N-methyl-D-azpartate)受体NR1a与NR2A亚单位重组体的细胞模型,研究其生物学及药理学特性。方法:利用脂质体转染方法将大鼠NR1a与NR2A亚单位重组体共转染到HEK-293细胞中。在细胞培养48—72h后,利用膜片钳全细胞记录技术,观察和分析L-谷氨酸诱发的NMDA受体电流。结果:向转染后的HEK-293细胞表面喷射NMDA受体激动剂L-谷氨酸可在38%细胞上诱发出瞬时内向电流,该电流可被NMDA受体选择性拮抗剂D-APS(50μnol/L)完全阻断。L-谷氨酸诱发的电流具有快速失敏的动力学特征和内向整流特性。衰减时间常数(τ值)为(53±9)ms(n=20)。L-谷氨酸诱发电流的EC50值为(8.5±0.5)μmol/L。结论:成功地将NR1a与NR2A亚单位转染入HEK-293细胞并形成NMDA受体的功能性表达,为进一步深入研究NMDA受体不同亚单位组成与其功能的关系及其药理学特性奠定了基础。
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