作者：邹琳; 兰建云; 宋曙; 邵伟伟; 陈海涛; 江...基因克隆乳腺
摘要：目的构建人类野生型过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)及其突变型PPARγMut基因的真核表达质粒。方法采用RT-PCR和重叠延伸PCR技术扩增人类野生型及功能区缺失的突变型PPARγ全长序列,通过DNA重组技术分别将其重组于pcDNA3.1-Myc载体,构建myc标记的PPARγWT及PPARγMut融合蛋白表达质粒,通过酶切电泳分析和DNA测序的方法对重组表达质粒进行鉴定。结果通过酶切电泳和测序结果证实,构建的重组表达质粒目的基因片段为人类野生型PPARγ及突变型PPARγMut的cDNA。结论成功构建野生型及其功能区缺失的突变型PPARγ质粒,为进一步探讨PPARγ基因在乳腺癌发生和发展中的作用奠定了基础。
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