作者:冉林武; 陈菲; 鲁晓丽; 杨文; 陈健茂; 李...解耦联蛋白2表型分析小鼠
摘要:目的对解耦联蛋白2(UCP2)转基因(UCP2(+/+))和UCP2敲除(UCP2(-/-))小鼠进行鉴定及表型初步分析。方法采用PCR法鉴定UCP2(+/+)和野生型(C57BL/6J)小鼠UCP2基因的表达。采用Western blot法检测UCP2(+/+)、UCP2(-/-)和C57BL/6J小鼠肝脏UCP2蛋白的表达。绘制012周龄UCP2(+/+)、UCP2(-/-)和C57BL/6J小鼠生长曲线,并肉眼观察UCP2(+/+)和UCP2(-/-)小鼠在外观和行为上有无异常。分别采用高脂饮食和普通饮食饲喂UCP2(+/+)、UCP2(-/-)和C57BL/6J小鼠12周,检测其空腹血糖和胰岛素水平。结果UCP2(+/+)小鼠UCP2基因片段为280bp,且肝脏表达相对分子量约为32kD的UCP2蛋白。与C57BL/6J小鼠相比,UCP2(+/+)小鼠肝脏UCP2表达量升高(P0.05)。与饲喂普通饲料相比,高脂饲料能升高C57BL/6J和UCP2(+/+)小鼠空腹血糖水平(P〈0.05),提高UCP2(-/-)小鼠胰岛素的分泌(P〈0.05)。结论成功鉴定了小鼠UCP2(+/+)和UCP2(-/-)基因型;高脂饮食下,UCP2与小鼠血糖水平和胰岛素分泌相关。
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