作者：顾曼丽; 卢春cd2相关蛋白启动子
摘要：目的构建表达CD2AP基因转录起始位点上游启动子的表达质粒,转染人类胚胎肾（HEK）-293T细胞,评价其启动子活性。方法以人全血细胞总DNA为模板,PCR扩增CD2AP转录起始位点上游2082bp的启动子区片段。亚克隆此片段至无启动子活性的pGL-3基本载体荧光素酶报告基因上游的多克隆位点,构建含CD2AP启动子的重组报告质粒。转染HEK-293T细胞,行荧光素酶活性检测,计算相对活性单位（RLU）。生物信息学分析转录因子结合位点。结果酶切,测序鉴定证实成功构建含有CD2AP基因转录起始位点上游2082bp的启动区的表达质粒。CD2AP的启动子与正常的pGL-3基本质粒比较,其RLU增加了74.8倍。其上游启动子区序列中含多个转录因子结合序列如AP1、Sp1、CREB和GATA-1等。结论 CD2AP转录起始位点上游序列在HEK-293T细胞中具有较强的启动活性。
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