作者：吴艳; 黄茂; 姚欣; 查王健; 殷凯生肺内基因转染免疫蛋白印迹法质粒dna表达质粒目的基因小鼠脑组织尾静脉注射正常小鼠体内转染不同途径脂质体蛋白质
摘要：目的构建β肾上腺素能受体激酶抑制剂(β ARKct)的表达质粒,并研究其在正常小鼠肺内的表达.方法 (1)取正常小鼠脑组织作为模板,经RT-PCR取得目的基因,构建以质粒pcDNA3.1为载体的表达质粒.(2)通过脂质体的包裹后,以不同的质粒DNA剂量经尾静脉注射和气道滴入途径进行体内转染.用免疫蛋白印迹法检测蛋白质的表达.结果 (1)经测序表达质粒的序列完全正确.(2)不同途径转染的目的基因在肺内都有表达,但表达的量不同.结论构建含有目的基因βARK1的碳基末端的质粒在肺部有表达,表达的量与转染途径和质粒DNA的量相关.
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