作者:高珊; 张凯; 朱树华肥城桃基因表达基因表达调控冷信号
摘要:磷脂酶fl(Pifl)能催化磷酸二酯键水解和碱基交换,其水解产物磷脂酸可以作为第二信使,参与植物信号转导过程。几乎在植物所有的生命阶段及对环境胁迫的应答中,Pifl都起着重要的作用。本试验借助分子生物学手段,在体外构建了pET30a-PLDa重组表达载体,并成功地在表达菌株7>imsetta(DE3)中进行表达。研究发现PLDa蛋白氨基酸序列存在2个HKD基序,两基序间隔320个氨基酸,亲水性平衡系数为-0.417,表明PLDa蛋白为疏水性蛋白。系统进化树构建结果显示,桃果实PLDa蛋白与草莓PLDa蛋白二者亲缘关系最近;三维结构模拟存在的“洞穴”结构可以很好地解释该蛋白的疏水性。实时荧光定量PCR结果表明,低温能提高Pifla基因mRNA基因表达水平。
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