作者:黄益洪; 刘蔼民; 汤日圣; 张大栋; 童红玉...烟草叶绿体转化壮观霉素人白细胞介素2基因
摘要:以人白细胞介素2(IL-2)基因为目的基因,烟草accD和ORF184同源序列为侧翼引导序列构建成烟草叶绿体转化载体pAIL。以火烟草NC89为转化受体,通过基因枪方法对烟草叶片进行轰击转化。轰击参数为:每枪0.6μm的金粉300~500μg,轰击距离6cm,真空度9.48×10^4Pa。在500mg/L的壮观霉素筛选眶下,经约30d的筛选分化,逐渐产牛绿色的抗壮观霉素芽或愈伤,目前已获得31株(丛)抗性芽及8块抗性愈伤。用IL-2基因的PCR引物对4株较大的小苗进行检测,初步证明3株为转基因植株。
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