作者:陈兴祥; 薛家宾; 徐为中; 周永银; 诸玉梅抗原基因工程疫苗克隆扩增产物衣壳蛋白致死表达兔出血症病毒人工感染酶切
摘要:从人工感染兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV)致死的兔肝脏组织中粗提病毒,采用SDS-蛋白酶K法提取RHDV RNA作为扩增摸板,根据Genbank已发表的RHDV的核酸序列,自行设计了1对引物,进行RT-PCR扩增,获得RHDV VP60的主要抗原域片段.经琼脂糖凝胶电泳分析其大小约为1 393 bp,将扩增产物提纯后克隆至PET-32α(+)载体质粒中,经转化和进一步筛选,酶切鉴定证实获得了RHDV VP60主要抗原域基因的克隆,从而为该基因的表达和基因工程疫苗的研制奠定了基础.
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