作者：杨永恒; 徐晓洋; 孙玉明; 原海燕; 刘清泉...甜菊srugt76g1启动子调控元件植物表达载体基因瞬时表达
摘要：甜菊苷(stevioside，St)和莱鲍迪苷A(rebaudioside A，R-A)是甜菊叶片中两大主要糖苷组分，甜菊糖苷生物合成途径的研究表明SrUGT76G1基因在St向R-A转化中起关键作用。为了进一步研究SrUGT76G1基因的表达调控，本试验采用hiTAIL-PCR的方法，经过2次步移从甜菊基因组中克隆到SrUGT76G1基因翻译起始位点上游2283bp的启动子序列。采用PlantCARE、PLACE等在线工具对序列进行分析，结果显示在这段序列上共有475个顺式调控元件，除了TATA-box、CAAT-box、MYB结合位点等典型的保守元件外，还包括光照、干旱、厌氧等环境因子响应元件，生长素、赤霉素等植物激素响应元件，芽、胚乳等组织特异性表达元件等。为了初步研究SrUGT76G1基因启动子的功能，本试验通过克隆SrUGT76G1转录起始位点上游1989 bp带酶切位点的序列，将其替换植物表达载体pCAMBIA1301-220中的CaMV35S启动子，连接下游的GUS报告基因，构建重组植物表达载体pCAMBIA1301-220-SrUGT76G1P，以pCAMBIA1301-220载体作对照，通过农杆菌(EHA105)真空渗透法转入拟南芥和甜菊幼苗。瞬时表达结果表明，该SrUGT76G1启动子序列能驱动GUS基因在拟南芥和甜菊叶片中表达，具有启动子活性。
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