作者：王晓醒; 李淑娟; 谢永丽; 李长慧梭罗草指纹图谱aflp体系以礼草属预扩增选扩增引物种质鉴定
摘要：利用梭罗草（Kengyilia thoroldiana）基因组DNA优化并建立的梭罗草扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism,简称AFLP）反应体系。预扩增反应体系25μL：连接产物1μL,10×PCR Buffer 2.5μL,d NTP 0.375μL,Mg~（2＋）1μL,Taq DNA聚合酶0.5μL,EcoRⅠ预扩引物1μL,MseⅠ预扩引物1.2μL,dd H2O加至25μL;选扩增反应体系25μL：预扩产物（稀释20倍）2.0μL,10×PCR Buffer 2.5μL,d NTP 0.60μL,Mg~（2＋）2μL,Taq DNA聚合酶0.1μL,EcoRⅠ选扩引物1.5μL,Mse I选扩引物2.5μL,dd H2O加至25μL。利用优化后的AFLP体系,从梭罗草、大颖草（K.grandiglumis）、疏花以礼草（K.laxiflora）共10份供试材料中筛选出216对选择性扩增引物,从中筛选出38对具有多态性的引物并从中选出6对条带清晰、鉴别效率高的引物,其中E16C4、E4C10的扩增条带中均有梭罗草的特征条带,为梭罗草的种质鉴定及利用提供科学依据。
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