作者：赵李婧; 曹新文; 李永梅; 马海霞; 闫洁; ...橡胶草hmgr基因原核表达亚细胞定位总三萜提取物
摘要：分析橡胶草HMGR基因的表达情况,构建原核表达载体,转化BL21菌株并诱导表达。构建细胞融合表达载体,转化GV3101菌株并侵染洋葱表皮细胞,在共聚焦显微镜下观察基因表达情况。构建植物过表达载体并侵染烟草,利用紫外分光光度法检测三萜含量的变化。通过IPTG诱导和SDS-PAGE检测,获得分子量为62.659 1 ku的蛋白,与预期蛋白相符合,且37℃诱导6 h时表达最明显;通过激光共聚焦显微镜观察,该基因主要在细胞膜上表达;紫外可见分光光度法表明转基因烟草中三萜的含量高于空白烟草。橡胶草HMGR基因分别在大肠杆菌、洋葱鳞片内表皮和烟草中成功表达。
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