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萝卜mRNA差异显示技术反应体系的优化及应用

作者:张慧蓉; 龚义勤; 柳李旺; 杨金兰; 黄丹琼...萝卜差异显示技术体系优化应用

摘要:以萝卜品种短叶十三为材料,对影响mRNA差异显示(DDRT—PCR)反应体系的主要因子进行优化试验,最终确定了优化体系(15μl):随机引物0.5μmol/L,锚定引物1.0μmol/L,dNTPs0.1—0.2mmol/L,Mg^2+1.5mmol/L,模板cDNA 15ng,TaqDNA聚合酶0.9U;并对PCR扩增程序中的复性温度进行梯度筛选,表明40℃较适合于萝卜mRNA差异显示(DDRT-PCR)反应体系。同时应用该优化体系分别对短叶十三花芽分化和扬花萝卜、春萝卜BYC抽薹过程中基因的差异表达进行初步分析。

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江苏农业科学

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