抗日本血吸虫SEA特异性IgY应用于循环抗原检测的研究

作者：楼涤; 陆绍红; 陈睿; 童群波; 丁建祖; 卓...igy日本血吸虫循环抗原双抗体夹心elisa

摘要：本研究应用抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）的鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）建立敏感、特异的检测循环抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。用SEA皮下多点注射法免疫海蓝鸡，水稀释法制备IgY抗体，以辣根过氧化物酶标记纯化的IgY抗体（IgY·E）和兔抗IgG抗体（IgG—E）分别作为检测抗体，IgY抗体和兔抗IgG抗体分别作为捕捉抗体，组合建立4种双抗体夹心酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测循环抗原，分析各种方法检测SEA的灵敏度，并平行检测急性日本血吸虫病人血清6份、慢性日本血吸虫病人血清29份、华支睾阳性者血清9份、卫氏并殖吸虫阳性者血清15份、弓形虫阳性病人血清7份、正常体检者血清118份。结果显示，以IgY为捕捉抗体或检测抗体，可检测到浓度为7．5ng／mL的SEA，灵敏度是基于IgG的夹心ELISA的4倍。4种夹心ELISA法检测急血病人血清阳性率均为100％，检测正常人血清的特异性为99．1％；与弓形虫、华支睾吸虫阳性者血清无交叉反应；-而检测慢血病人血清和并殖吸虫阳性者血清时，以IgY为捕捉抗体的2种ELISA（IgY＋IgY—E、IgY＋IgG—E）阳性率均分别为79．3％、6．7％；而IgG为捕捉抗体时，以IgY为检测抗体（IgG＋IgY—E）时的阳性率分别为75．8％、6．7％，以IgG为检测抗体（IgG＋IgG-E）时的阳性率分别为72．4％、13．3％，以IgY作为捕捉抗体的检测效果优于IgG。基于IgY抗体的双抗体夹心ELISA检测循环抗原具有良好的敏感性和特异性，可用于日本血吸虫病的免疫诊断。

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