作者：李建华; 张西臣; 陈丽凤; 尹继刚; 陈超柔嫩艾美耳球虫cdna文库构建球虫卵囊cdna表达文库pcr鉴定mrna分离纯化功能基因
摘要：利用Trizol一步法从柔嫩艾美耳球虫孢子化10h卵囊提取总RNA.利用poly(A)Quik mRNA Isolationkit分离纯化了mRNA.采用cDNA Synthesis Kit合成cDNA,以XR-λZAP为载体,构建了cDNA表达文库,经蓝白斑筛选,其重组率为98%,滴度为0.9×106pfu/mL,扩增后滴度为1×109pfu/mL.随机取10个克隆,提取λDNA后,经PCR鉴定,插入片段长度大于0.4Kb.该cDNA表达文库的构建为下一步功能基因的筛选等奠定了良好基础.
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