堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究

作者：覃宗华; 谢明权; 蔡建平; 艾哈迈德; 叶秀...堆型艾美耳球虫减毒沙门氏菌效果研究免疫保护减毒鼠伤寒沙门氏菌表面抗原基因质粒表达载体特异性iggpcr方法孢子化卵囊重组质粒高效表达iptg表达产物重组蛋白抗体水平子孢子广东株电转化

摘要：用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架(ORF),与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E.coli X6212,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)X4550.经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S.typhimurium的高效表达,表达产物占菌体总蛋白的9.2%,重组蛋白分子量约为19 kDa.将重组减毒S.typhimurium分别以108或109CFU/鸡经口免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG,3周时抗体水平达到峰值;25日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌.免疫后3周,试验鸡分别经口攻击感染500个E.acervulina孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;计数攻虫感染后第3.5～9.5天卵囊总产量,2个免疫组分别能降低25.1%和46.4%的卵囊产生.

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