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NT-3促进脂多糖诱导的M1型巨噬细胞向M2表型极化

作者:王军华; 丁英; 曾园山脂多糖m1型巨噬细胞m2型巨噬细胞

摘要:目的探讨神经营养素-3(NT-3)能否促进脂多糖(LPS)诱导的M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞株,分为LPS组和LPS+NT-3组。用脂多糖(100ng/ml)刺激12h后,撤掉LPS培养基,冲洗,分别加入基础培养基和含有NT-3(40ng/m1)的基础培养基,培养24h后,全部置换成基础培养基培养24h,收集上清与细胞。固定后的细胞分别做CD68/CCR7(M1型细胞标记物)、CD68/CD206(M2型细胞标记物)、CD68/TrkC免疫荧光双标染色。用酶联吸附试验(ELISA)检测上清中TNF-α和IL-10水平。结果免疫荧光细胞化学染色显示,LPS刺激后的巨噬细胞表达NT。3的受体TrkC。LPS组可观察到较多的M1型细胞和较少的M2型细胞。LPS+NT-3组可观察到M1型细胞数减少,而M2型细胞数增多。与LPS组比较,LPS+NT-3组的M1型巨噬细胞比例降低,同时M2型巨噬细胞比例增加(P〈0.01)。ELISA结果显示,与LPS组比较,LPS+NT-3组上清中TNF—α的水平明显下降(P〈0.01),IL-10的水平相对升高但是差异不明显(P〉0.05)。结论NT-3促进M1型巨噬细胞向M2型极化可能通过与其受体TrkC结合发挥作用,进而减少促炎因子TNF-α的分泌。

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解剖学研究

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