作者：王小杰; 赵依纳; 李欣膜联蛋白a5细胞周期蛋白d1实时定量聚合酶链反应免疫印迹法流式细胞术人
摘要：目的探讨敲低膜联蛋白A5（ANXA5）对人胃癌细胞系MGC-803、MKN-45细胞周期相关蛋白表达的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组及空白对照组,采用脂质体转染法将靶向膜联蛋白A5的siRNA以及阴性siRNA分别转染干扰组和阴性对照组MGC-803、MKN-45细胞,空白对照组不加任何试剂。转染后48 h采用Real-time PCR和Western bloting分别从mRNA和蛋白水平检测ANXA5的表达,确定ANXA5被敲低之后,Realtime PCR和Western bloting检测各组p21-（cip1）mRNA和P21-（cip1）的表达,Western bloting检测各组细胞周期蛋白D1（cyclin D1）蛋白的表达,流式细胞术检测各组细胞周期的变化情况。结果敲低ANXA5后,与阴性对照组和空白对照组相比,两种细胞的p21-（cip1）mRNA和P21-（cip1）蛋白均显著降低（P〈0.05）,cyclin D1（P〈0.05）也显著降低。结论敲低ANXA5可下调MGC-803、MKN-45细胞中p21-（cip1）mRNA和P21-（cip1）蛋白以及cyclin D1的表达,推测ANXA5可能通过作用于细胞周期相关蛋白而引发细胞周期阻滞从而影响着胃癌的发展。
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