作者:王丽纳; 王凯波; 庄永灿; 王红兰增殖侵袭环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1转染a375细胞实时定量聚合酶链反应人
摘要:目的 探讨miR-182对人皮肤黑素瘤细胞系A375细胞的增殖与侵袭能力的影响,及miR-182影响黑色素细胞增殖的机制。方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-182模拟物或抑制剂转染人黑素瘤A375细胞,以使miR-182过表达或低表达,采用MTT方法检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化,同时通过Real-time PCR检测核转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(CREB1)mRNA的表达情况,采用Western blotting检测CREB1蛋白的表达水平。结果 与对照组相比,miR-182沉默能够显著增强A375细胞增殖和侵袭能力,P〈0.01,显著降低CREB1蛋白与mRNA的表达水平,P〈0.01;miR-182过表达的作用与之相反。结论 miR-182沉默增强A375细胞增殖和侵袭能力可能与降低CREB1蛋白相关。
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