作者：刘美菊; 陈新霞卵母细胞线粒体皮质颗粒纺锤体微丝染色体激光扫描共焦显微术小鼠
摘要：目的 探讨高龄小鼠卵母细胞线粒体、皮质颗粒、微丝、纺锤体及染色体形态和排布的变化规律。方法将雌性昆明小鼠分为年轻组（4~8周）和高龄组（48~52周）。腹腔内注射孕马血清促性腺激素（PMSG）10IU/只行促排卵,48 h后腹腔内注射人绒毛膜促性腺激素（h CG）10 IU/只,14 h后收集输卵管的卵冠丘复合物（OCCC）。脱去颗粒细胞,获取成熟卵母细胞（MⅡ期）经2%多聚甲醛固定。抗小鼠α-tubulin单克隆抗体染色卵母细胞纺锤体的微管,罗丹明标记的鬼笔环肽染色微丝,FITC结合的小扁豆凝集素染色皮质颗粒,Mito Tracker Green FM染色线粒体。激光扫描共焦显微镜下观察。结果 共获取小鼠卵母细胞372枚,其中年轻组179枚,高龄组193枚。高龄组小鼠卵母细胞纺锤体异常率（71.78%±1.27%）、染色体排列异常率（65.16%±1.52%）明显高于年轻组（18.93%±1.27%,32.24%±1.10%）（P〈0.01,P〈0.01）;高龄组小鼠卵母细胞线粒体的荧光强度（28.09±6.62）明显低于年轻组（45.07±5.90）（P〈0.01）;高龄组小鼠成熟皮质颗粒（Ⅲ级皮质颗粒）（51.00%±1.00%）明显低于年轻组（94.04%±0.71%）（P〈0.01）。结论 高龄小鼠卵母细胞中各主要细胞器、细胞骨架及染色体排列异常率明显增加,可能是导致高龄受孕率低的重要原因。
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