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缺氧缺血对O-2A祖细胞膜铁转运蛋白1表达的影响

作者:林清; 张更; 邱荣晖; 王玮膜铁转运蛋白1缺氧缺血实时定量一聚合酶链反应免疫印迹法

摘要:目的观察膜铁转运蛋白1(FPNl)在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后的表达变化,探讨其在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤中的作用。方法体外培养O-2A祖细胞,以特异性抗体A285鉴定,观察FPNl在O-2A祖细胞上的定位表达;以糖氧剥夺(OGD)法建立缺氧缺血细胞模型,CCK8法检测细胞存活率;应用免疫荧光染色法、实时荧光定量PCR法和Westernblotting法观察FPNl在细胞缺氧缺血后的表达变化。结果FPNl定位表达于O-2A祖细胞的细胞膜、细胞质和突起;OGD3h、6h、12h及24h细胞存活率呈时间依赖性降低(P〈0.05);OGDl2h内细胞FPNl免疫荧光强度进行性减弱;与OGD0h相比,FPNlmRNA和蛋白水平在OGD3h表达下调,OGD6h进一步降低,OGDl2h最低,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后FPNl表达明显下调,细胞存活率显著降低,提示FPNl可能参与O-2A祖细胞的缺氧缺血损伤过程。

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解剖学报

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