作者：闫凤霞; 钱涛; 高维娟; 叶冬青; 张雅丽; ...海马神经元黄芪注射液缺氧缺糖复氧复糖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3反转录一聚合酶链式反应大鼠
摘要：目的观察黄芪注射液对缺氧缺糖／复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因Caspase．3表达的影响。方法取原代培养8d的大鼠海马神经元，随机分为正常对照组、缺氧缺糖／复氧复糖组、黄芪注射液溶剂对照组和黄芪注射液组。除正常对照组外均进行缺氧缺糖0．5h再复氧复糖。各组于复氧复糖后Oh、0．5h、2h、6h、24h、48h、72h和120h采用免疫组织化学染色法检测Caspase-3阳性神经元数目，采用原位杂交和RT—PCR方法检测海马神经元caspase-3mRNA的表达，实验重复6次。结果免疫组织化学和原位杂交结果显示，与正常对照组相比，除Oh和0．5h之外，缺氧缺糖／复氧复糖组各时间点海马Caspase-3蛋白、caspase-3mRNA阳性神经元数目占神经元总数的百分率及平均吸光度值均明显增加（P〈0．05），于24h达到高峰。黄芪注射液溶剂对照组以上指标的变化趋势与缺氧缺糖／复氧复糖组-致（P〉0．05）。黄芪注射液组除0h和0．5h之外，各时间点以上指标比缺氧缺糖／复氧复糖组显著减少（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，除0h和0．5h外，各时间点缺氧缺糖／复氧复糖组海马神经元caspase-3mRNA的平均吸光度值均较正常对照组明显增加（P〈0．05），复氧复糖24h平均吸光度值最高；与缺氧缺糖／复氧复糖组相比，除0h和O．5h外，黄芪注射液溶剂对照组各时间点caspase-3mRNA的平均吸光度值无明显变化（P〉0．05），而黄芪注射液组在各个时间点easpase-3mRNA的平均吸光度值明显降低（P〈0．05）。结论黄芪注射液可抑制缺氧缺糖／复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因caspase-3的表达，从而抑制缺氧缺糖／复氧复糖大鼠海马神经元的凋亡。
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